elisa實驗前至關(guān)重要導(dǎo)致差異
天津睿創(chuàng)生物科技有限公司提供的優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品主要體現(xiàn)在產(chǎn)品的質(zhì)量上,讓消費者能夠迅速認(rèn)可,確定該產(chǎn)品品質(zhì)的優(yōu)異,并且我司積極開展節(jié)能降耗措施,將節(jié)能降耗落實到每個生產(chǎn)環(huán)節(jié)!以下是ELISA試劑盒實驗時至關(guān)重要的步驟僅供參考:
重要的洗滌:
* 不充分的洗滌會導(dǎo)致差異和高背景,從而帶來不理想的實驗結(jié)果。如果未結(jié)合的材料殘留在微孔板中,那么它會增加背景噪音。有必要的話,可增加洗滌液中的鹽濃度,這會阻止非特異結(jié)合反應(yīng)。如果背景過高,懷疑洗滌不夠時,可以嘗試增加洗滌次數(shù)。
關(guān)鍵的封閉:
* 封閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點。這就降低了可產(chǎn)生信號的抗體非特異結(jié)合的機會。如果背景過高,懷疑封閉不充分,那么可以嘗試使用更高濃度的封閉液,或適當(dāng)延長封閉時間。目前主要有兩種類型的封閉液:蛋白和非離子型去污劑。使用的類型須取決于多個因素,包括微孔板的表面試劑、吸附的抗原、抗體和檢測試劑。好的封閉液應(yīng)降低非特異性結(jié)合,但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢測試劑發(fā)生相互作用。
抗體濃度須優(yōu)化:
* 如果試劑稍有不同,則可能需要優(yōu)化抗體的量。非特異的抗體結(jié)合會增加背景。為了防止這一點,切勿使用過多的一抗或二抗。
檢測試劑要適量:
* 切勿使用過多的檢測試劑。如果濃度過高,或者未正確稀釋,則會導(dǎo)致高背景。ELISA試劑盒也不要顯色過度,如有必要,優(yōu)化一下何時應(yīng)加入終止液。只有確保每一步操作都做到位,才會呈現(xiàn)wan美的實驗結(jié)果。所以ELISA實驗的每一步都很重要,不可以掉以輕心。
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